风疹病毒IgG抗体检测试剂盒（酶联免疫法）

【产品名称】

通用名称：风疹病毒lgG抗体检测试剂盒（酶联免疫法）

【包装规格】

96人份／盒

【预期用途】

本产品用于体外定性检测人血清／血浆或全血样本中的风疹病毒lgG抗体。适用于风疹病毒感染的辅助诊断。

风疹病毒是一种包膜病毒，属风疹病毒科，仅有一种血清型，与其他包膜病毒无交叉反应。风疹是一种急性病毒感染，在全球范围内一般仅影响易感儿童和年轻成人。风疹的发生具有季节性，且每5～9年发生一次流行。流行的程度和周期性在发达国家和发展中国家不同，可能与各国的免疫接种情况不同相关，在开展大规模风疹疫苗接种前儿童感染风疹的平均年龄为2～12岁。风疹病毒通过呼吸道传播，一开始在鼻咽部黏膜及局部淋巴结复制，潜伏期为12～23天，风疹的临床症状如一般感冒，通常先有上感一般症状及耳后和枕下淋巴结肿大，随后面部出现潜红色斑丘疹并迅速遍及全身。妇女妊娠期感染可能引起胎儿死亡或先天性风疹综合症。

风疹病毒感染14～18天可检测出抗体，此时大约同步出现斑丘疹。lgM和lgG抗体滴度初起均出现上升，随后lgG持续处于较高滴度，而lgM抗体滴度迅速降低，lgG水平在感染至4～6周后达到高峰，然后逐渐下降到某一水平并持续终生。

目前风疹病毒lgG的临床和实验室检测方法主要有间接血凝抑制试验、乳胶凝集试验、酶联免疫吸附、单向辐射状溶血实验和荧光抑制试验等。

【检验原理】

试剂盒采用酶联免疫间接法原理。

本试剂盒系用灭活纯化风疹病毒抗原包被微孔板。样品加入微孔后，其中抗风疹病毒抗体与微孔中固相化风疹病毒抗原形成抗原-抗体免疫复合物，洗涤去除未结合物，加入辣根过氧化酶标记小鼠抗人lgG单克隆抗体，使其反应形成抗原-抗体-酶标二抗复合物，洗涤未参与反应的酶结合物，加TMB底物显色，呈色的深浅与风疹病毒lgG抗体的含量成正比。

【主要组成成分】

【储存条件及有效期】

1．于2～8℃避光保存，禁止冷冻，有效期为12个月。

2．未用完的板条应立即放于密封袋中封存。开封过的试剂盒应在一周内用完。

3．生产日期及失效日期等见标签。

【适用仪器】

含450nm波长的酶标仪或全自动酶免分析仪。

【样品要求】

1．人血清／血浆或全血均可用作测定样本。抗凝剂（肝素、EDTA、柠檬酸钠）对样本检测结果无干扰。

2．血清／血浆样品2～8℃冷藏保存可稳定一周，但建议在72小时内使用；全血样本即采即用；若需长期保存，血清／血浆样品可直接-20℃冷冻保存可稳定一年，全血样本可用样品稀释液稀释后吸出上清液，-20℃冷冻保存可稳定一年。冻存的样本冻融次数建议不超过3次。

3．应避免使用溶血、脂血样本，不能使用被污染的样本。

【检验方法】

1．样品准备

1.1 先向1.5ml离心管中加入样品稀释液500μl。编号。

1.2采集全血10μl，或吸取血清／血浆5μl，加入相应的离心管中，立即轻摇、混匀。

1.3 若为全血样品，将离心管置室温（或4℃冰箱）静置，待红血球全部沉降到孔底，取上清液检测；若为血清或血浆样品，混匀后即可使用。

2．将试剂盒和样品从冷藏环境中取出，放置30分钟，平衡至室温；恒温箱或水浴锅调节至37±1℃。

3．配制洗涤液：1倍体积的浓缩洗涤液加入19倍体积的蒸馏水、纯化水或去离子水，混匀。

4. 加样：每次试验设阳性对照1孔、阴性对照1孔，每孔加入相应的对照液100μl；设空白对照1孔，加样品稀释液100μl；其余每孔加入已稀释的样品（全血样本取上清液）100μl。贴上封口膜，置37℃温育60分钟后，小心将封口膜揭掉，倒掉孔中的液体。每孔加300μl已稀释好的洗涤液，轻微振摇10秒后倒掉，拍干。重复5次。有条件的可按上述洗涤条件设置参数，用洗板机洗涤。

5．加抗人lgG抗体酶标记物：每孔100μl（空白孔不加）。贴上封口膜，置37℃温育30分钟后，小心将封口膜揭掉，倒掉孔中的液体。每孔加300μl 已稀释好的洗涤液，轻微振摇10秒后倒掉，拍干。重复5次。

6．显色：每孔加底物液A及底物液B各50μl，混匀。贴上封口膜，置于37℃避光显色15分钟。

7．测定：小心将封口膜揭掉，每孔加终止液50μl，混匀。30分钟内用酶标仪双波长450nm／630nm测定各孔OD值（使用单波长450nm时，必须以空白孔调零）。

【参考值】

1．阴性对照OD₄₅₀＜0.3，阳性对照OD₄₅₀≥0.6，试验成立。

【检验结果的解释】

1．阳性结果：提示风疹病毒既往感染或产生风疹病毒抗体。

2．阴性结果：提示无风疹病毒既往感染或无风疹病毒抗体。

3．可疑结果：建议重复检测或两周后再次检测，动态观察抗体水平的变化。

【检验方法的局限性】

仅用于风疹病毒感染的辅助诊断及风疹病毒lgG抗体的定性检测。